克隆测序服务
克隆测序服务 科赛特科技拥有成熟的克隆测序服务技术和完善的服务流程,帮您从根本上提高科研工作效率。
客户提供信息 DNA模板以及上下游引物或者PCR原液(不少于100微升),同时需提供参考序列。 如果不是T/A克隆,还需要提供指定克隆载体。
样品说明 ●送样的形式:PCR原液或者纯化好的PCR产物。 如果您只提供模板和引物,要求我们为您进行PCR并克隆测序,基于技术方面的原因,请预先来电咨询; ●提供样品质量:PCR原液要求不小于100微升,目的条带清晰,总DNA量在1微克以上;纯化好的PCR产物要求目的条带清晰,电泳检测亮度在不小于30纳克/微升; ●样品末端:请注明您进行PCR时所使用的酶的名称,用Pfu酶扩增得到的PCR产物由于两端没有加A,不能直接用于T/A克隆。所以,请提供您的扩增引物和引物的序列,以方便我们克隆验证; ●以上要求仅限于PCR产物长度在2Kb以下的样品,如果您的PCR产物长度高于2Kb,基于技术方面的原因,请预先来电咨询。
服务价格 ●每个样品按照200元克隆费+总测序费(45元/测序反应)的标准收费; ●当所挑选的3个不同克隆测序结果一致时,无论序列是否是客户想要的,都将按照以上规定收费
我们提交结果 ●测序报告 ●一份包含目的片段的质粒 ●相应菌株
PCR产物克隆及亚克隆 科赛特科技的克隆技术不依赖于载体的酶切位点,能够将目的基因片段直接克隆客户所需载体的指定位点,故相比于普通克隆大大节省了时间。对于不同基因片段的同载体克隆,我们可以完成高通量亚克隆。
客户提供信息 ●模板信息,客户的原始序列必须提供测序彩图,不能提供序列的加测序验证费用35元/反应,30元/测序引物 ●目的载体信息;客户自己构建的质粒必须提供测序结果 ●目标DNA片段序列及两端酶切位点 ●非常用的限制性内切酶由客户自己提供,或我们帮助订货,费用客户自理,剩余产品返回
我们提交结果 ●一份冻干后的测序质粒(约5μg) ●穿刺菌 ●相应测序结果
服务价格
片段长度 |
价 格(¥) |
周 期 |
<1000bp |
1000.00 |
5个工作日 |
1000-2000bp |
2000.00 |
7个工作日 |
2000-3000bp |
询价 |
/ |
PCR扩增及克隆服务 客户提供模板以及扩增相关信息,由我们设计合成引物并进行后续的PCR扩增,TA克隆实验。
客户提供信息 ●模板及目标片段大小 ●目的载体信息 ●目标DNA片段两端需要增加的酶切位点或其它特殊序列 ●非常用的限制性内切酶由客户自己提供,或我们帮助订货,费用客户自理,剩余产品返回
我们提交结果 ●一份冻干后的测序质粒(约5μg) ●穿刺菌 ●相应测序结果
服务价格
片段长度 |
价 格(¥) |
周 期 |
<1000bp |
1000.00 |
5-7个工作日 |
1000-2000bp |
1500.00 |
7-10个工作日 |
2000-3000bp |
询价 |
/ |
TA克隆 利用Taq聚合酶同时具有的末端添A的功能,在每条PCR扩增产物的3' 端自动添加一个3'-A突出端。将客户提供的PCR产物连接到pTG19-T载体中,转化,筛选,测序。捷瑞生物TA克隆系统提供的T载体用于直接高效地连接PCR产物。
客户提供信息 ●未纯化的PCR产物 ●PCR产物电泳图片 ●引物序列 ●扩增用酶,如果使用含3'→5' 外切酶活性的聚合酶,请提供PCR引物
我们提交结果 ●一份冻干后的送测质粒(约5μg) ●相应测序结果 ●穿刺菌 ●pTG19-T载体图谱和序列 ●TA克隆实验报告
片段长度 |
价 格(¥) |
周 期 |
<600bp |
300.00 |
5个工作日 |
600~1500bp |
400.00 |
5个工作日 |
1500~3000bp |
600.00 |
8个工作日 |
>3000bp |
询价 |
/ |
其他说明: 1. 我们一般使用pTG19-T载体,如果需要使用其他T载体,请注明。 2. PCR产物纯化、克隆后,筛选三个以上阳性克隆,送一个进行测序反应,判断测序结果正确的依据是送测克隆中含有大小相符的插入片段,并可以看到客户的引物序列(只要包含其中一侧引物)。由于模板来源的不同和PCR过程中可能会引入突变,我们不能保证序列是否与客户期望完全相符。 3.我们一次收费内容只包含PCR纯化,连接转化,克隆筛选,一个测序反应,及质粒和穿刺菌。当克隆片段大于600bp时,需要测通全序列,按照正常对外测序要加收相应的测序及合成中间测序引物的费用。 4.如果客户使用含3'→5' 外切酶活性的聚合酶扩增所得到的PCR产物,我们需要重新扩增PCR产物,则要加收PCR扩增费用50元。 5.如果使用其它T载体,则需加收费用50元。如果客户需要可提供其他阳性克隆的穿刺菌,需另外收费20元/克隆。
Gateway兼容性克隆 Dev-G载体为卡纳抗性,在插入位点两端含有attL1和attL2序列,此序列可作为后续其它GateWay系列兼容性载体的构建。当目标序列被克隆到Dev-G载体后,可方便的用于Gateway系列载体的亚克隆或后续操作,不用考虑酶切位点。
客户提供信息 仅需客户提供模板及目标全序列(如有特殊需求请说明)
我们提交结果 ●一份冻干后的测序质粒(约5μg) ●穿刺菌 ●相应测序结果
服务价格
片段长度 |
价 格(¥) |
周 期 |
<1000bp |
1000.00 |
5-7个工作日 |
1000-2000bp |
1500.00 |
7-10个工作日 |
2000-3000bp |
询价 |
/ |
定点突变 定点突变是指通过PCR等方法向目的DNA片段中引入所需变化,包括碱基的添加、删除、点突变等。定点突变能迅速、高效的提高DNA所表达的目的蛋白的性状及表征,是基因研究工作中一种非常有用的手段。
客户提供信息 ●需要突变的质粒及相关载体大小与抗性等。 ●基因原始序列(客户的原始序列必须提供测序彩图)及突变目标序列;不能提供序列的加测序验证费用35元/反应,30元/测序引物。 ●基因两端酶切位点。
我们提交结果 ●一份冻干后的测序质粒(约5μg) ●穿刺菌 ●测序结果 ●比对结果
服务价格
片段长度 |
1个突变(¥) |
2个突变(¥) |
3个突变(¥) |
周 期 |
<1000bp |
800.00 |
1400.00 |
1900.00 |
5-7个工作日 |
1000~3000bp |
1000.00 |
1700.00 |
2300.00 |
7-10个工作日 |
>3000bp |
1300.00 |
2200.00 |
2900.00 |
/ |
相邻的两个碱基突变(6bp以内)按照一个点收费;更大的基因,更多的点突变请询价。 |