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Fermentas创造了FastDigest®限制酶产品线

 
  限制性内切酶识别DNA短序列并切割DNA双链。由于其精确性、简单的系统性以及众多的特异性,限制酶已成为分子生物学领域广泛使用的工具。在所有已知的限制酶中,约三分之一是在Fermentas发现的——Fermentas是限制酶研究和生产领域的领导者。
  采用传统的限制酶消化DNA具有明显的不便之处:这些酶的工作缓冲液系统多达4个或以上;需要不同的孵育温度;为了完整地切割DNA需要较长的孵育时间(至少1小时)。因此,当使用几种不同的限制酶消化DNA时可能会花几小时的时间。
  基于不断积累的关于限制酶的知识,Fermentas创造了FastDigest®限制酶产品线。FastDigest®限制酶在一个通用的缓冲液中、在相同的温度下工作,从而消除了对缓冲液兼容性、温度改变的担心,并使得任何底物DNA的多酶切反应时间减少至5或15分钟。与传统限制酶相比,FastDigest®酶对DNA的切割更直接更快速。此外,FastDigest®酶被推荐用于质粒、Lambda、基因组DNA和PCR产物的消化,这在市场上是独一无二的。Fermentas不仅提供限制性内切酶,更通过FastDigest®酶提供了方便的解决方案。
 

特点:
●     所有FastDigest®酶通用同一种缓冲液
●     所有消化反应发生在同一温度下
●     5分钟或15分钟完成消化反应
●     1mL酶切割1mg DNA
●     无需顺次酶切
●     在延长孵育时间时不会出现星号活力和DNA降解
用途:
●     快速克隆分析
●     快速制备载体用于克隆
●     快速消化PCR产物
●     快速消化基因组DNA
●     标准的DNA酶切反应
 

 
注意:
●     低质量质粒DNA可能需要更长的孵育时间
●     使用胶纯化DNA可以获得最大的连接效率
 
示例:



Clone analysis: five minute digestion with FastDigest® enzymes.
A recombinant pJET1 plasmid containing 953 bp insert was purified from recombinant E.coli culture using the GeneJET™ Plasmid Miniprep Kit and digested in 5 minutes with FastDigest® enzymes.
M - GeneRuler™ Express DNA Ladder
1 - plasmid containing insert
2 - plasmid containing insert, digested with FastDigest® NotI
3 - plasmid containing insert, digested with FastDigest® BamHI
4 - plasmid containing insert, double digested with FastDigest® NotI and FastDigest® BamHI
5 - plasmid containing insert in the opposite orientation, double digested with FastDigest® NotI and FastDigest® BamHI

FastDigest® 限制性内切酶列表: 
 

, ,
原型
特异性 5'=>3'
目录号
原型
特异性 5'=>3'
目录号
AatII
GACGT^C
FD0994
HaeIII
GG^CC
FD0154
AccI
GT^MKAC
FD1484
HgaI
GACGC(5/10)^
FD1904
KpnI (GGTAC^C)
G^GTACC
FD0904
HhaI
GCG^C
FD1854
AciI
CCGC(-3/-1)^
FD1794
HindII
GTY^RAC
FD0494
AclI
AA^CGTT
FD0944
HindIII
A^AGCTT
FD0504
Eco57I
CTGAAG(16/14)^
FD0344
HinfI
G^ANTC
FD0804
Eco47III
AGC^GCT
FD0324
HhaI (GCG^C)
G^CGC
FD0484
AflII
C^TTAAG
FD0834
HpaI
GTT^AAC
FD1034
AgeI
A^CCGGT
FD1464
HpaII
C^CGG
FD0514
AjuI
^(7/12)GAA(N)7TTGG(11/6)^
FD1954
MjaIV
GTN^NAC
FD1574
OliI
CACNN^NNGTG
FD1634
MwoI
GCNNNNN^NNGC
FD1734
HgiAI
GWGCW^C
FD0024
BspMI
T^CCGGA
FD0534
BsmAI
GTCTC(1/5)^
FD0034
KpnI
GGTAC^C
FD0524
AlwNI
CAGNNN^CTG
FD1394
MauBI
CG^CGCGCG
FD2084
AluI
AG^CT
FD0014
MboI
^GATC
FD0814
ApaI
GGGCC^C
FD1414
MboII
GAAGA(8/7)^
FD0824
ApaLI
G^TGCAC
FD0044
MfeI
C^AATTG
FD0753
FD0754
AscI
GG^CGCGCC
FD1894
MluI
A^CGCGT
FD0564
VspI
AT^TAAT
FD0914
PleI (GAGTC(4/5)^)
GAGTC(5/5)^
FD1374
SgfI
GCGAT^CGC
FD2094
MnlI
CCTC(7/6)^
FD1074
AvaI
C^YCGRG
FD0384
Sse232I
CG^CCGGCG
FD2024
AvaII
G^GWCC
FD0314
BalI
TGG^CCA
FD1214
AvrII
C^CTAGG
FD1564
MslI
CAYNN^NNRTG
FD2004
BamHI
G^GATCC
FD0054
HpaII
C^CGG
FD0544
HgiCI
G^GYRCC
FD1004
PmeI
GTTT^AAAC
FD1344
BbvII
GAAGAC (2/6)^
FD1014
EcoRII (^CCWGG)
CC^WGG
FD0554
BbvI
GCAGC(8/12)^
FD2074
BsmI
GAATGC(1/-1)^
FD0964
BclI
T^GATCA
FD0724
NaeI
GCC^GGC
FD1524
MaeI
C^TAG
FD1764
CauII
CC^SGG
FD0064
BglI
GCCNNNN^NGGC
FD0074
NcoI
C^CATGG
FD0573
FD0574
BglII
A^GATCT
FD0083
FD0084
NdeI
CA^TATG
FD0583
FD0584
EspI
GC^TNAGC
FD0094
NheI
G^CTAGC
FD0973
FD0974
BseSI
GKGCM^C
FD1444
NlaIII
CATG^
FD1834
NheI (G^CTAGC)
GCTAG^C
FD2044
NlaIV
GGN^NCC
FD1154
BplI
^(8/13)GAG(N)5CTC(13/8)^
FD1314
Tsp45I
^GTSAC
FD1514
GsuI
CTGGAG(16/14)^
FD0464
NotI
GC^GGCCGC
FD0593
FD0594
FD0596
Bpu10I
CCTNAGC(-5/-2)^
FD1184
NruI
TCG^CGA
FD2154
原型
特异性 5'=>3'
目录号
原型
特异性 5'=>3'
目录号
BsaAI
YAC^GTR
FD1974
AvaIII
ATGCA^T
FD0734
BsaBI
GATNN^NNATC
FD1714
NspI
RCATG^Y
FD1474
AcyI
GR^CGYC
FD0474
XmnI
GAANN^NNTTC
FD1534
SecI
C^CNNGG
FD1084
PflMI
CCANNNN^NTGG
FD0714
FokI (GGATG(9/13)^)
GGATGNN^
FD0874
PfoI
T^CCNGGA
FD1754
BsrI
ACTGG(1/-1)^
FD0884
PmaCI
CAC^GTG
FD0364
BbvI
GCAGC(8/12)^
FD1454
PpuMI
RG^GWCCY
FD0764
FnuDII
CG^CG
FD0924
PshAI
GACNN^NNGTC
FD1434
McrI
CGRY^CG
FD0894
PsiI
TTA^TAA
FD2064
SplI
C^GTACG
FD0854
PstI
CTGCA^G
FD0614
BsiYI
CCNNNNN^NNGG
FD1204
XhoII
R^GATCY
FD1554
Esp3I
CGTCTC(1/5)^
FD0454
Tth111I
GACN^NNGTC
FD1334
FinI
GGGAC(10/14)^
FD1814
PvuI
CGAT^CG
FD0624
AsuII
TT^CGAA
FD0124
PvuII
CAG^CTG
FD0634
ApaI (GGGCC^C)
G^GGCCC
FD0134
RsaI
GT^AC
FD1124
SduI
GDGCH^C
FD0654
RsrII
CG^GWCCG
FD0744
Bsp1407I
T^GTACA
FD0933
FD0934
SacI
GAGCT^C
FD1133
FD1134
BseMII
CTCAG(10/8)^
FD1404
SalI
G^TCGAC
FD0644
BspHI
T^CATGA
FD1284
SanDI
GG^GWCCC
FD2164
BspMI
ACCTGC(4/8)^
FD1744
SapI
GCTCTTC(1/4)^
FD1934
BsrBI
CCGCTC(-3/-3)^
FD1274
MboI
^GATC
FD0784
BsrDI
GCAATG(2/0)^
FD1264
AsuI
G^GNCC
FD0194
Cfr10I
R^CCGGY
FD0184
Sse8387I
CCTGCA^GG
FD1194
BsePI
G^CGCGC
FD2134
ScaI
AGT^ACT
FD0434
SauI
CC^TNAGG
FD0374
ScrFI
CC^NGG
FD1424
BstXI
CCANNNNN^NTGG
FD1024
 
A^CCWGGT
FD2114
SnaI
GTA^TAC
FD0704
 
GCATC(5/9)^
FD2124
ClaI
AT^CGAT
FD0143
FD0144
SfeI
C^TRYAG
FD1164
RsaI (GT^AC)
G^TAC
FD0214
SfiI
GGCCNNNN^NGGCC
FD1824
DdeI
C^TNAG
FD1884
SmaI
CCC^GGG
FD0663
FD0664
DpnI
Gm6A^TC
FD1703
FD1704
SnaBI
TAC^GTA
FD0404
AhaIII
TTT^AAA
FD0224
SpeI
A^CTAGT
FD1253
FD1254
DraIII
CACNNN^GTG
FD1234
SphI
GCATG^C
FD0604
DrdI
GACNNNN^NNGTC
FD1724
SspI
AAT^ATT
FD0774
XmaIII
C^GGCCG
FD0334
StyI
C^CWWGG
FD0414
Eam1105I
GACNNN^NNGTC
FD0244
StuI
AGG^CCT
FD0424
Ksp632I
CTCTTC(1/4)^
FD0234
SwaI
ATTT^AAAT
FD1244
SacI (GAGCT^C)
GAG^CTC
FD0254
Tsp4CI
ACN^GT
FD1364
原型
特异性 5'=>3'
目录号
原型
特异性 5'=>3'
目录号
Eco31I
GGTCTC(1/5)^
FD0293
FD0294
MaeII (A^CGT)
ACGT^
FD1144
BstEII
G^GTNACC
FD0394
TaqI
T^CGA
FD0674
EcoNI
CCTNN^NNNAGG
FD1304
TatI
W^GTACW
FD1294
DraII
RG^GNCCY
FD0264
TauI
GCSG^C
FD1294
EcoRI
G^AATTC
FD0274
TfiI
G^AWTC
FD1784
EcoRV
GAT^ATC
FD0303
FD0304
MseI
T^TAA
FD0984
NarI (GG^CGCC)
GGC^GCC
FD0443
FD0444
TspEI
^AATT
FD1354
Fnu4HI
GC^NGC
FD1644
TspRI
CASTG^(2/-7)^
FD2104
FokI
GGATG(9/13)^
FD2144
ApoI
R^AATTY
FD1383
FD1384
MstI
TGC^GCA
FD1224
XbaI
T^CTAGA
FD0684
FspAI
RTGC^GCAY
FD1664
XhoI
C^TCGAG
FD0694

Single letter code:
R = G or A;Y = C or T;W = A or T;M = A or C;K = G or T;S = C or G ;H = A, C or T;V = A, C or G;B = C, G or T;D = A, G or T;N = G, A, T or C
* Unpurified PCR products should be digested for at least 1 hour
** Not applicable for fast digestion of PCR products
 
将分析您克隆的速度提高3
 

步骤
传统操作
快速操作
用于快速操作的Fermentas产品
小量抽提纯化DNA
40 min
15 min
准备酶切的Master mix
6 min
6 min
FastDigest® restriction enzymes (see the table above)
DNA消化
60 min
5 min
电泳
40 min
17 min
总耗时:
146 min
43 min
 


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