基因组DNA解析-Fosmid文库构建服务
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Fosmid 载体是现在流行的用于替代 Cosmid 载体构建大片段文库的新载体，与BAC文库构建相比，Fosmid文库的构建更简单，快速。其优点如下:
1. 由于插入了大肠杆菌致育因子F-因子，所以它在宿主菌中以单拷贝形式存在，稳定性好。
2. Fosmid载体上有一个可诱导的oriV高拷贝复制起始点，需要时可诱导达到高拷贝 (50个左右) 。
3. 随机性好，保证了每段DNA在文库中出现的频率均等。
近年来，Fosmid文库已被广泛应用于基因的图位克隆、物理图谱的构建和比较基因组研究中。 |
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| ■ Fosmid文库的构建 |
◇ Fosmid文库质量标准
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| 文库的滴度≥104，阳性克隆平均插入片段长度为35 kbp左右。 |
| ◇ Fosmid文库构建的方法 |
1. 将研磨后的动、植物组织碎片包装到明胶中形成胶块，经处理后进行基因组释放处理，融解胶块回收基因组DNA。
2. 将基因组DNA用物理的方法进行切断处理，然后对DNA片段进行末端平滑磷酸化处理。
3. 进行脉冲电泳，回收38 kbp-48 kbp之间的DNA片段。
4. 将回收后的DNA片段连接到特定的载体上，4℃过夜。
5. 将连接液进行包装，转染。
6. 确认滴度及片段插入率。
7. 根据客户需要可以进行Fosmid DNA末端测序，也可以进行文库甘油菌保存。 |
| ◇ 对客户提供样品的要求 |
1. 动、植物组织：要提供新鲜且单一的组织20 g，如果组织含油脂很多，组织提供量还需要再多些
(注：如果油脂过多，DNA收量少)。
2. 基因组DNA：要求完整，纯度高，无RNA污染，总量大于 50 μg。 |
| ◇ Fosmid文库相关报价 |
| NO. |
操作类型 |
费 用 |
| 1 |
提取基因组DNA |
询价 |
| 2 |
Fosmid文库构建 |
询价 |
| 3 |
Fosmid文库单克隆 (96 well) 甘油菌保存 |
询价 |
| 4 |
Fosmid文库 clone pool(96 well) 甘油菌保存 |
询价 |
| 5 |
Fosmid单板 (96 well) DNA提取及琼脂糖凝胶电泳 |
询价 |
| 6 |
Fosmid单板 (96 well) DNA两个末端测序 |
询价 | | |
| 合计费用:客户要求公司进行的所有作业类型费用之和为合计费用。 |
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